Automatisierte Überwachung von Wundheilungs- und Migrationsassays – 24 Wells parallel, kontinuierliche kinetische Daten, Echtzeit-Gap-Closure-Analyse. Keine manuelle Bildgebung. Keine verpassten Zeitpunkte.
Das Wundheilungs-, Migrations- oder Krätzchen-Assay ist eine Standardmethode zur Analyse der Zellmigration in vitro. Die Dynamik der Zellmigration in einen zellfreien Bereich wird überwacht und quantifiziert, um Migrationscharakteristiken zu analysieren und die Zeit bis zur Lückenbildung zu berechnen.
Mit konventioneller manueller Mikroskopie ist es nicht möglich, jede dynamische Veränderung auf Zellebene zu erfassen. zenCELL owl zeichnet alle 5 Minuten Bilder auf – so werden jede Zellbewegung detailliert erfasst, selbst bei Langzeitanalysen über Tage hinweg.
Beobachten und steuern Sie jeden Zeitpunkt des Wundheilungsprozesses retrospektiv. Berechnen Sie die Spaltenschlussgeschwindigkeit durch Analyse der Konfluenzzunahme im Spaltbereich. Bestimmen Sie die t½-Spaltenschlusszeit automatisch.
Gleichzeitige Analyse von Zellmorphologie und Konfluenz in bis zu 24 Wells unter identischen Inkubationsbedingungen. Optimiert die Vergleichbarkeit von Ergebnissen und die Reproduzierbarkeit von Daten über Bedingungen, Medikamente und Zelllinien hinweg.
Es wurde ein Migrationsassay mit L929-Fibroblasten über 24 Stunden durchgeführt. Der Spalt wurde zu Zeitpunkt Null in einem konfluenten Monolayer eingefügt. Innerhalb von 24 Stunden führt die kontinuierliche Zellmigration zum vollständigen Verschluss des Spalts – erfasst automatisch zu jedem Zeitpunkt.
L929-Mausfibroblasten — Timelapse des Scratch-Assays über 24 Stunden. Lücke bei 0 h mit einer Pipettenspitze eingefügt. Vollständiger Verschluss bei 24 h sichtbar. Digitale Phasenkontrastbildgebung. Maßstabsbalken: 200 µm.
Relative Spaltflächengröße als Funktion der Zeit — t½ Spaltverschluss automatisch aus Konfluenzdaten bestimmt
Zellbedeckungsdaten von zenCELL owl werden verwendet, um die relative Lückenfläche zu jedem Zeitpunkt zu berechnen. Aufgetragen als Funktion der Zeit wird die Halbzeit der Lückenverkleinerung (t½ Gap Closure) direkt aus der Konfluenzkurve bestimmt.
Anwendungshinweis – Kratztest
Vollständiges Protokoll, Methode zur Lückenanalyse und Daten für Kratztests mit zenCELL owl.
Vom Zellaussaat bis zum finalen Datenexport – der komplette automatisierte Scratch-Assay-Workflow mit zenCELL owl. Jeder Schritt dokumentiert, jeder Zeitpunkt erfasst.
Zellsaat in 24-Well-Platten und Wachsen bis zur vollständigen Konfluenz. Verwenden Sie beschichtete Platten für optimale Adhäsion und konsistente Monoschichtbildung.
Verwenden Sie eine Pipettenspitze für Standard-Assays – oder den zenCELL Scratch Maker (lichtbasiert, ECM-erhalten) für physiologische Migrationsstudien. Volle 24-Well-Platte in 60 Sekunden.
Entfernen Sie abgelöste Zellen. Geben Sie Medikamentenbehandlung, Inhibitor oder Wachstumsfaktor in definierten Konzentrationen in 24 Wells.
Überführen Sie die Transferplatte in das zenCELL owl im Inkubator. Definieren Sie das Bildgebungsintervall (5–30 Min.). Die kontinuierliche Überwachung startet automatisch – keine weiteren manuellen Schritte erforderlich.
Die Software berechnet die relative Spaltfläche automatisch zu jedem Zeitpunkt. Wachstumskurven werden pro Vertiefung generiert. Die t½ Spaltbildung wird aus Konfluenzdaten bestimmt – keine manuelle Messung.
CSV-Daten und Zeitraffer-Videos exportieren. Vergleich der Lückenschlussgeschwindigkeiten über alle 24 Bedingungen hinweg. Vollständige retrospektive Analyse beliebiger Zeitpunkte – publikationsfertige Daten.
Nicht alle Kratzer sind gleich. Die Methode zur Erzeugung des Spaltes beeinflusst grundlegend die Biologie des Migrationsassays.
Vollständiger Methodenvergleich: Migrationsassay-Methoden im Vergleich
Das obige Beispiel verwendet eine manuelle Pipettenspitzen-Kratzmethode. Für publizierbare, physiologische Migrationsdaten verwendet der zenCELL owl Scratch Maker eine lichtbasierte Technologie, die Zellen und extrazelluläre Matrix (ECM) vollständig schont.
Ein manuelles Pipettenspitzen-Kratzen zerstört die Zellschicht und die EZM. Der Scratch Maker nutzt phototonische Technologie, um eine präzise, reproduzierbare Lücke ohne mechanischen Kontakt zu erzeugen. 24 identische Kratzer in 60 Sekunden.
Erleben Sie, wie zenCELL owl Zell-Gap-Closure in echten Zellen in einem realen Inkubator verfolgt. Auf Anfrage via MS Teams. Unverbindlich.
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Sehen Sie sich das Live-Bild der zenCELL-Eule im Brutkasten an. Verfügbar.