伤口愈合、迁移测定或划痕测定是在体外分析细胞迁移的标准方法。监测和量化细胞迁移到无细胞区域的动态,以分析迁移特征并计算伤口闭合时间。.
传统的显微镜无法捕捉细胞级别的每一次动态变化。zenCELL owl 每 5 分钟记录一次图像,即使在长达数天的长期分析中,也能详细捕捉到每一个细胞的移动。.
追溯监测和控制伤口愈合过程的每一个时间点。通过分析愈合区域融合度的增加来计算伤口闭合速度。自动确定伤口闭合的半衰期时间 (t½)。.
可同时分析多达24个孔的细胞形态和汇合度,且所有孔均处于相同的培养箱条件下。优化了结果的可比性和跨条件、药物及细胞系的实验数据的可重复性。.
对L929成纤维细胞进行为期24小时的迁移实验。在零时,在融合的单层细胞中创建了一个缺口。24小时内,细胞持续迁移,导致缺口完全闭合——在每个时间点自动捕获。.
L929 小鼠成纤维细胞 — 24 小时划痕实验延时。0 小时用移液器尖端插入缺口。24 小时可见完全愈合。数字相差显微成像。标尺:200 微米。.
相对间隙面积随时间的变化 — 自动从汇合数据确定的 t½ 间隙闭合
zenCELL owl 的细胞覆盖数据用于计算每个时间点的相对空隙面积。半空隙闭合时间(t½ Gap Closure)是直接从汇合曲线中确定的,并绘制为时间的函数。.
从细胞接种到最终数据导出——zenCELL owl 全面的自动化划痕实验流程。每一步都有记录,每一时间点都被捕捉。.
将细胞接种到 24 孔板中,培养至完全汇合。使用涂层板以获得最佳的粘附效果和一致的单层形成。.
使用移液器吸头进行标准检测——或使用 zenCELL Scratch Maker(基于光,保留细胞外基质)进行生理迁移研究。60 秒内完成整块 24 孔板。.
洗去脱落的细胞。在 24 个孔中以设定的浓度添加药物处理、抑制剂或生长因子。.
将载玻片放入孵箱内的zenCELL owl。定义成像间隔(5-30分钟)。连续监测将自动开始——无需进一步手动操作。.
软件自动计算每个时间点的相对缺口面积。每个孔生成生长曲线。½ 缺口闭合时间根据汇合度数据确定 — 无需手动测量。.
导出 CSV 数据和延时视频。比较所有 24 种条件下的间隙闭合速度。对任何时间点进行完整的追溯性分析 — 可供出版的数据。.
并非所有划痕都相同。用于产生细胞空隙的方法会从根本上影响迁移实验的生物学特性。.
| 方法 | 细胞损伤 | ECM | 可重复性 | 吞吐量 | 费用 |
|---|---|---|---|---|---|
| 移液器吸头 | 高——细胞被摧毁 | 摧毁 | 低 — 取决于运算符 | 手动 · 慢 | 非常低 |
| Ibidi 插入件 | 无 | 无法涂层 | 高 | 手动 · 中等 | 高每盘 |
| ✓ 刮刮乐制作者 | 无 — 光基 | 完好无损 | 非常高——每次都一样 | 60秒24孔 | 一次性设备 |
方法对比: 迁移实验方法比较
以上示例使用手动移液器尖端划痕。对于可用于发表的生理迁移数据,zenCELL owl Scratch Maker 使用基于光的技术——完全保留细胞和细胞外基质。.
手动移液器吸头刮擦会破坏细胞层和细胞外基质。划痕制造器采用光子技术,在不进行任何机械接触的情况下创建精确、可重复的间隙。60秒内产生24个相同的划痕。.
在孵化器中实时观看 zenCELL 猫头鹰图像。可用。.