Surveillance automatisée de la cicatrisation des plaies et des essais de migration — 24 puits en parallèle, données cinétiques continues, analyse en temps réel de la fermeture de l'espace. Pas d'imagerie manuelle. Pas de points temporels manqués.
La cicatrisation de la plaie, le test de migration ou le test de grattage est une méthode standard pour analyser la migration cellulaire in vitro. La dynamique de la migration cellulaire dans une zone dépourvue de cellules est surveillée et quantifiée pour analyser les caractéristiques de la migration et calculer le temps de fermeture de la brèche.
Avec la microscopie manuelle conventionnelle, il n'est pas possible de capturer chaque changement dynamique au niveau cellulaire. zenCELL owl enregistre des images toutes les 5 minutes, capturant chaque mouvement cellulaire en détail, même lors d'analyses à long terme sur plusieurs jours.
Analyser et contrôler chaque étape du processus de cicatrisation des plaies rétrospectivement. Calculer la vitesse de fermeture de la plaie en analysant l'augmentation de la confluence dans la zone de la plaie. Déterminer automatiquement le temps de demi-fermeture (t½) de la plaie.
Analyse simultanée de la morphologie cellulaire et de la confluence dans jusqu'à 24 puits dans des conditions d'incubateur identiques. Optimise la comparabilité des résultats et la reproductibilité des données entre les conditions, les médicaments et les lignées cellulaires.
Un essai de migration de fibroblastes L929 a été réalisé sur 24 heures. Le sillon a été inséré dans un monocouche confluent au temps zéro. En 24 heures, la migration continue des cellules entraîne la fermeture complète du sillon – capturée automatiquement à chaque point temporel.
Fibroblastes de souris L929 — timelapse de l'essai de migration sur 24 heures. Brèche insérée à 0h par la pointe d'une pipette. Fermeture complète visible à 24h. Imagerie numérique en contraste de phase. Échelle : 200 µm.
Aire de l'écart relatif en fonction du temps — t½ fermeture de l'écart déterminée automatiquement à partir des données de confluence
Les données de couverture cellulaire de zenCELL owl sont utilisées pour calculer la zone de décalage relative à chaque point temporel. Représenté en fonction du temps, le temps de fermeture de moitié du décalage (t½ Fermeture du décalage) est déterminé directement à partir de la courbe de confluence.
Note d'application — Test de rayure
Protocole complet, méthode et données pour l'analyse de fermeture de lacune des essais de grattage avec zenCELL owl.
De l'ensemencement cellulaire à l'exportation finale des données — le flux de travail complet automatisé de l'essai de rayure avec zenCELL owl. Chaque étape documentée, chaque point de temps capturé.
Semer les cellules dans une plaque à 24 puits et les laisser atteindre une confluence complète. Utiliser des plaques revêtues pour une adhésion optimale et une formation de monocouche cohérente.
Utilisez une pointe de pipette pour les tests standards — ou le zenCELL Scratch Maker (basé sur la lumière, préservant la MEC) pour les études de migration physiologique. Plaque entière de 24 puits en 60 secondes.
Laver les cellules détachées. Ajouter le traitement médicamenteux, l'inhibiteur ou le facteur de croissance à des concentrations définies sur 24 puits.
Transférez la plaque dans le zenCELL owl à l'intérieur de l'incubateur. Définissez l'intervalle d'imagerie (5–30 min). La surveillance continue commence automatiquement — aucune autre étape manuelle n'est nécessaire.
Le logiciel calcule automatiquement la surface relative de la gap à chaque point temporel. Des courbes de croissance sont générées par puits. Le t½ de fermeture de la gap est déterminé à partir des données de confluence — aucune mesure manuelle.
Exporter les données CSV et les vidéos en accéléré. Comparer les vitesses de fermeture des écarts dans les 24 conditions. Analyse rétrospective complète de n'importe quel point temporel — données prêtes à être publiées.
Toutes les éraflures ne sont pas égales. La méthode utilisée pour créer l'espace affecte fondamentalement la biologie de l'essai de migration.
| Méthode | Dommages cellulaires | ECM | Reproductibilité | Débit | Coût |
|---|---|---|---|---|---|
| Pointe de pipette | Élevé — cellules détruites | Détruit | Bas — dépendant de l'opérateur | Manuel · lent | Très bas |
| Insert Ibidi | Rien | Aucun revêtement possible | Haut | Manuel · modéré | Haut par assiette |
| ✓ Fabricant de Scratch | Aucune — basée sur la lumière | Intact | Très haut — identique à chaque fois | 24 puits en 60 secondes | Appareil à usage unique |
Comparaison complète des méthodes : Méthodes de test de migration comparées
L'exemple ci-dessus utilise une rayure manuelle avec une pointe de pipette. Pour des données de migration physiologiques de qualité de publication, le zenCELL owl Scratch Maker utilise une technologie basée sur la lumière, préservant entièrement les cellules et la matrice extracellulaire.
Une rayure de pointe de pipette manuelle détruit la couche cellulaire et la MEC. Le Scratch Maker utilise une technologie photonique pour créer une brèche précise et reproductible sans aucun contact mécanique. 24 rayures identiques en 60 secondes.
Regardez zenCELL owl suivre la fermeture des lacunes dans de vraies cellules à l'intérieur d'un vrai incubateur. Sur demande via MS Teams. Sans engagement.
Regardez l'image de zenCELL owl en direct à l'intérieur d'une couveuse. Disponible.