Monitoreo automatizado de ensayos de curación y migración de heridas — 24 pocillos en paralelo, datos cinéticos continuos, análisis en tiempo real del cierre de la brecha. Sin imágenes manuales. Sin puntos de tiempo perdidos.
La curación de heridas, el ensayo de migración o ensayo de raspado es un método estándar para analizar la migración celular in vitro. La dinámica de la migración celular hacia un área libre de células se monitoriza y cuantifica para analizar las características de migración y calcular el tiempo de cierre de la brecha.
Con la microscopía manual convencional no es posible capturar cada cambio dinámico a nivel celular. zenCELL owl registra imágenes cada 5 minutos, capturando cada movimiento celular en detalle, incluso durante análisis a largo plazo de varios días.
Observar y controlar cada punto de tiempo del proceso de curación de heridas retrospectivamente. Calcular la velocidad de cierre de la hendidura analizando el aumento de la confluencia en el área de la hendidura. Determinar el tiempo de t½ de cierre de la hendidura automáticamente.
Análisis simultáneo de la morfología y la confluencia celular en hasta 24 pocillos bajo condiciones idénticas de incubadora. Optimiza la comparabilidad de los resultados y la reproducibilidad de los datos entre condiciones, fármacos y líneas celulares.
Se realizó un ensayo de migración de fibroblastos L929 durante 24 horas. El espacio se insertó en un monocapa confluente en el tiempo cero. Dentro de las 24 horas, la migración celular continua da como resultado el cierre completo del espacio, capturado automáticamente en cada punto de tiempo.
Fibroblastos de ratón L929 — timelapse de ensayo de rascado de 24 horas. Brecha introducida a las 0h con la punta de una pipeta. Cierre completo visible a las 24h. Imagen digital de contraste de fase. Barra de escala: 200 µm.
Área del espacio relativo en función del tiempo — Tasa de cierre del espacio determinada automáticamente a partir de datos de confluencia
Los datos de cobertura celular de zenCELL owl se utilizan para calcular el Área de Brecha Relativa en cada punto de tiempo. Representado en función del tiempo, el tiempo de cierre de media brecha (t½ Cierre de Brecha) se determina directamente a partir de la curva de confluencia.
Nota de aplicación — Ensayo de scratch
Protocolo completo, método de análisis de cierre de brechas y datos para ensayos de scratch con zenCELL owl.
Desde la siembra celular hasta la exportación de datos final — el flujo de trabajo completo automatizado de ensayo de rascado con zenCELL owl. Cada paso documentado, cada punto de tiempo capturado.
Sembrar células en una placa de 24 pocillos y cultivarlas hasta alcanzar la confluencia total. Usar placas recubiertas para una adhesión óptima y una formación de monocapa consistente.
Use una punta de pipeta para ensayos estándar — o el zenCELL Scratch Maker (basado en luz, con ECM conservada) para estudios de migración fisiológica. Placa completa de 24 pocillos en 60 segundos.
Lave las células desprendidas. Agregue tratamiento con fármaco, inhibidor o factor de crecimiento en concentraciones definidas en 24 pocillos.
Transfiera la placa al owl zenCELL dentro de la incubadora. Defina el intervalo de imágenes (5-30 min). El monitoreo continuo comienza automáticamente: no se necesitan más pasos manuales.
El software calcula automáticamente el Área Relativa del Espacio en cada punto de tiempo. Curvas de crecimiento generadas por pocillo. La semivida de cierre del espacio se determina a partir de datos de confluencia: sin mediciones manuales.
Exportar datos CSV y videos a intervalos. Comparar las velocidades de cierre de brechas en las 24 condiciones. Análisis retrospectivo completo de cualquier punto de tiempo — datos listos para publicación.
No todos los rasguños son iguales. El método utilizado para crear el espacio afecta fundamentalmente la biología del ensayo de migración.
Comparación completa de métodos: Métodos de ensayo de migración comparados →
El ejemplo anterior utiliza el rascado manual de la punta de pipeta. Para obtener datos de migración fisiológica de calidad para publicación, el zenCELL owl Scratch Maker utiliza tecnología basada en luz, preservando completamente las células y la matriz extracelular.
Un rasguño en la pipeta manual destruye la capa celular y la MEC. El Scratch Maker utiliza tecnología fotónica para crear un espacio preciso y reproducible sin ningún contacto mecánico. 24 rasguños idénticos en 60 segundos.
Vea cómo zenCELL owl rastrea el cierre de brechas en células reales dentro de una incubadora real. Bajo solicitud a través de MS Teams. Sin compromiso.
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Mira la imagen de zenCELL owl en vivo dentro de una incubadora. Disponible.